เครื่องคำนวณความเข้มข้นของโปรตีน

หมวดหมู่: ชีววิทยา
- เมษายน 03, 2568
| |
ค่าปกติอยู่ระหว่าง 0.5 ถึง 2.0
คิวเวตมาตรฐานมีความยาวเส้นทาง 1 cm
หากตัวอย่างถูกเจือจางก่อนการวัด (เช่น 5 = การเจือจาง 1:5)

ความเข้มข้นของโปรตีนโดยใช้การดูดซับที่ 280 นาโนเมตร (A280) ถูกกำหนดโดยใช้กฎของ Beer-Lambert:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

โดยที่:

  • \( C \) = ความเข้มข้นของโปรตีน (มก./มล.)
  • \( A \) = การดูดซับที่ 280 นาโนเมตร
  • \( \epsilon \) = สัมประสิทธิ์การสูญเสีย (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = ความยาวของเส้นทางใน cuvette (ซม.)

เครื่องคิดเลขความเข้มข้นของโปรตีนคืออะไร?

เครื่องคิดเลขความเข้มข้นของโปรตีนช่วยกำหนดความเข้มข้นของโปรตีนโดยใช้วิธีการต่างๆ รวมถึง:

  • การดูดซับที่ 280 นาโนเมตร (A280): วิธีที่รวดเร็วและไม่ทำลายซึ่งอิงจากกรดอะมิโนที่มีกลิ่นหอม.
  • การทดสอบ Bradford: วิธีการสีที่ใช้การยึดติดของสีย้อม.
  • การทดสอบ BCA (กรด Bicinchoninic): วิธีที่พึ่งพาการลดของทองแดงและการตรวจจับด้วยสี.
  • การทดสอบ Lowry: วิธีที่มีชื่อเสียงซึ่งใช้ปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนและทองแดง.

วิธีการใช้เครื่องคิดเลข

ทำตามขั้นตอนเหล่านี้เพื่อคำนวณความเข้มข้นของโปรตีน:

  • เลือกวิธีการวัด (A280, Bradford, BCA หรือ Lowry).
  • ป้อนค่าที่จำเป็นเช่น การดูดซับ, ปัจจัยการเจือจาง, และสัมประสิทธิ์การสูญเสีย (ถ้าจำเป็น).
  • หากใช้วิธีการมาตรฐาน (Bradford, BCA หรือ Lowry) ให้ป้อนพารามิเตอร์ของเส้นโค้ง.
  • คลิกปุ่ม "คำนวณ" เพื่อรับผลลัพธ์ความเข้มข้น.

ประโยชน์ของการใช้เครื่องคิดเลข

  • ประหยัดเวลาโดยการทำให้การคำนวณความเข้มข้นเป็นอัตโนมัติ.
  • รองรับหลายวิธีการวัดเพื่อความยืดหยุ่น.
  • รวมเครื่องคิดเลขการเจือจางสำหรับการเตรียมความเข้มข้นเฉพาะ.
  • ลดข้อผิดพลาดของมนุษย์ในการคำนวณด้วยมือ.

คำถามที่พบบ่อย

1. วิธีการดูดซับ (A280) มีความแม่นยำแค่ไหน?

วิธี A280 โดยทั่วไปมีความแม่นยำสำหรับโปรตีนบริสุทธิ์ แต่สามารถได้รับผลกระทบจากสารปนเปื้อนเช่น กรดนิวคลีอิก.

2. ฉันสามารถใช้การทดสอบ Bradford สำหรับโปรตีนทั้งหมดได้หรือไม่?

การทดสอบ Bradford ทำงานได้ดีสำหรับโปรตีนส่วนใหญ่ แต่สามารถให้ผลลัพธ์ที่แตกต่างกันขึ้นอยู่กับองค์ประกอบของโปรตีน.

3. ข้อดีของการทดสอบ BCA คืออะไร?

วิธี BCA เข้ากันได้ดีกับสารซักฟอกและมีช่วงเชิงเส้นที่กว้างกว่าการทดสอบ Bradford.

4. ฉันจะเลือกสัมประสิทธิ์การสูญเสียที่ถูกต้องสำหรับ A280 ได้อย่างไร?

ใช้ค่าที่เผยแพร่สำหรับโปรตีนที่รู้จัก หรือคำนวณสัมประสิทธิ์การสูญเสียตามองค์ประกอบของกรดอะมิโน.

5. ทำไมฉันต้องการปัจจัยการเจือจาง?

หากตัวอย่างของคุณถูกเจือจางก่อนการวัด คุณต้องคูณความเข้มข้นที่คำนวณได้ด้วยปัจจัยการเจือจางเพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายที่ถูกต้อง.